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Recombinase Polymerase Amplification
依赖于T4 UvsX重组酶介导引物与双链DNA同源区发生链交换,单链DNA结合蛋白gp32稳定重组结构,以及常温链置换聚合酶Bsu活性;
常温反应,扩增长度可达1kb;
适用于即时诊断POCT以及二代测序NGS扩增;
可配合抗原/荧光探针进行核酸检测反应。
来源于Leptotrichia buccalis CRISPR-Cas13a (C2c2)基因;
II类VI型CRISPR-Cas蛋白,RNA靶向的核酸酶。活化后其无差别切割活性被激活,可高效切割反应体系中的单链RNA底物;
具有极高的灵敏度和特异性,可用于检测单个RNA分子;
样品纯度>95%,无外源核酸酶活性。
高效高保真的DNA聚合酶,保真度为Taq的50倍;延伸速率2~4 kb/min;
高稳健性,反应成功率极高,需要优化步骤最少;
适用于高保真PCR、克隆、长片段PCR、复杂模板PCR、制备测序模板、高通量PCR、微阵列、诱变PCR;
具有3′-5′核酸外切酶活性,产物为平滑末端。