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包装内容：

产品简介：

来源于直肠杆菌II型内含子编码的反转录酶，具有超强反转录酶活。

持续合成能力极强，适用于>10kb RNA反转录。与来源于逆转录病毒的反转录酶保真度相当。

适合长转录本，复杂二级结构，以及含有抑制剂成分的RNA样本。

提高了长转录本的5’端测序覆盖，适用于RNA-seq应用。

在42℃，以poly(A).oligo(dT)18为底物，30分钟内催化完成1nmole dTTP掺入到酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位。

80°C孵育10分钟可失活。

使用说明：

反应体系

轻轻混匀后短暂离心。42℃孵育20分钟合成（超长RNA模版建议孵育1小时）。如使用随机引物，推荐25℃先孵育2分钟。95℃失活1分钟终止反转录反应。

反转录产物PCR扩增没有特异性条带的可能原因与建议：

1.      建议使用内参基因做对照。

2.      RNA模板降解，可以通过琼脂糖凝胶电泳分析总RNA质量。严格遵守RNA操作要求避免发生降解。

3.      RNA纯度低，存在抑制反转录反应残余成分，建议使用Trizol或柱纯化。

4.      RNA模板量不足，建议更换模板来源或DNase I去除DNA干扰。

5.      对于长片段cDNA反转录不建议使用热失活方法终止反应，可能会导致产物断裂。此时可以考虑酚氯仿抽提或柱纯化方法。

6.      对于复杂模板如高GC含量或二级结构，可以适当提高反应温度至45-50℃。

7.      某些情况可能需要去除cDNA互补RNA，可以加1ul (2U) RNase H在37℃孵育20分钟。