订购电邮:order@theta-gene.com
技术支持:support@theta-gene.com
加尾酶
*若您需要这支酶的表达载体和菌株,可以联系我们。
-20℃储存,<0℃运输。
包装内容:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P2026 | Poly(A) Polymerase (5U/μl) | 200U |
B2026 | 10X PAP Reaction Buffer | 1ml |
K1014 | ATP (10mM) | 150μl |
产品简介:
来源于大肠杆菌的Poly(A)聚合酶基因,也称为PAP酶或PolyA加尾酶。
催化不依赖模板的ATP转化为AMP并添加到单链RNA的3’末端,以形成Poly(A)尾巴。
底物为单链RNA分子,对双链RNA、DNA以及短的寡核苷酸无活性。
CTP/UTP掺入效率不足ATP的5%,GTP完全不能掺入。
用于放射性ATP或虫草素(cordycepin)标记RNA;为RNA添加Poly(A)尾,用于反转录后克隆或亲和纯化;提高转染至真核细胞中的RNA的翻译效率。
于37℃,10分钟内将1 nmol AMP掺入RNA所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
无外源核酸酶活性,无宿主DNA/RNA;蛋白纯度大于99%。
使用说明:
反应体系:解冻并彻底混匀各组分,于冰浴设置如下反应体系。
Component | 20μl reaction | Final Concentration |
10X PAP Reaction Buffer | 2μl | 1X |
RNA | xμl | up to 10 µg |
RNase Inhibitor (40U/μl) (Optional) | 0.5μl | 1U/μl |
10mM ATP | 2μl | 0.2µM (0.05~1µM) |
Poly(A) Polymerase (5U/μl) | 1µl | 50U |
Nuclease-free water | Up to 50µl |
37℃孵育30分钟。
反应可用EDTA(10mM)终止或直接进行产物纯化。