订购电邮:order@theta-gene.com
技术支持:support@theta-gene.com
基因工程热敏UDG
*若您需要这支酶的表达载体和菌株,可以联系我们。
-20℃储存,<0℃运输。
包装内容:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P2072 | Thermolabile Uracil-DNA Glycosylase (1U/μl) | 100/500U |
产品简介:
来源于大肠杆菌Uracil-DNA Glycosylase (UDG)基因工程热敏酶,在50℃孵育10分钟可以迅速不可逆灭活。。
催化含尿嘧啶的DNA链中的尿嘧啶(dU)碱基和脱氧核糖之间的N-糖苷键水解,释放游离尿嘧啶。
可水解含有dU的单链或双链DNA,但不能水解RNA或含有dU的长度不超过6个碱基DNA寡聚体。
用于消除PCR扩增过程中的产物污染问题。其原理为:在PCR反应中以dUTP替代dTTP,形成含dU碱基的PCR扩增产物;后续PCR反应前,使用UDG酶选择性切割可能被污染而带入的之前PCR扩增产生的含有dU的单链或双链DNA,从而避免之前的PCR扩增产物可能的污染对于本次PCR扩增带来的负面影响。于37℃、60分钟内催化完成1 nmole AMP掺入到多聚核苷酸中所需要的酶量定义为1个活性单位。
SP6启动子序列:5′-ATTTAGGTGACACTATAG-3′,下划线标注的G为转录起始碱基。
使用说明:
反应体系:解冻并彻底混匀各组分,设置如下反应体系。
Component | 20μl reaction | Final Concentration |
10X SP6 RNA Polymerase Buffer | 2μl | 1X |
NTP Mixture (10mM each) | 1μl | 0.5mM each |
线性DNA模板 | 1μg | |
RNase Inhibitor(可选) | 0.5μl | 1U/μl |
SP6 RNA Polymerase | 2μl | 40U |
Nuclease-free water | Up to 50µl |
轻轻混匀后短暂离心,于37℃孵育1-2小时。取1μl转录产物于1%琼脂糖电泳分析。
短的转录本反应可以适当延长孵育时间至2-16小时。
每1µg模板DNA可合成超过10µg的RNA,提高NTP浓度至4mM/MgCl2至20mM可以提高RNA产量。
注意事项:
酶取用时宜保存于冰盒内,使用完即放回-20ºC保存。
仅限于专业人员科研用,严禁用于临床诊断或治疗,食品或药品,不得存放于普通住宅内。
请穿戴实验服和一次性手套操作。