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Bst HF DNA Polymerase

Bst HF DNA Polymerase

高保真链置换聚合酶

*若您需要这支酶的表达载体和菌株,可以联系我们。

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高保真链置换聚合酶

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包装内容:

产品编号

产品名称

包装

P2007

Bst HF DNA Polymerase (8U/μl)

2000U

K1002

dNTP (10mM each)

1ml

K1004

MgSO4 (100mM each)

0.5ml

B2007

10X Bst HF Reaction Buffer

1ml

  

产品简介:

基于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus, Bst) DNA Polymerase I

大片段基因工程蛋白,具有5'→3' DNA聚合酶活性,不具有3'→5'5'→3'的核酸外切酶活性。具有很强的链置换(strand displacement)能力。

适用于环介导的等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP),链置换DNA合成以及微量DNA/GC区域DNA测序反应。

具备更快的扩增速度,产量,耐盐性和热稳定性。

65℃30分钟内催化完成25nmole dNTP掺入到酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位。

无外源核酸酶活性。

 

使用说明:

LAMP等温扩增反应体系

Component

25μl reaction

Final Concentration

10X Bst HF Reaction Buffer

2.5µl

1X (contains 2mM   MgSO4)

MgSO4 (100mM)

1.5µl

6mM (8mM total)

dNTP Mix (10mM)

3.5µl

1.4mM each

FIP/BIP Primers (25X)

1µl

1.6µM

F3/B3 Primers (25X)

1µl

0.2µM

Loop F/B Primers (25X)

1µl

0.4µM

Bst HF DNA Polymerase (8U/μl)

1µl

8U

DNA   Sample

variable

> 10 copies   or more

Nuclease-free   Water

to 25µl


轻轻混匀后短暂离心,65ºC孵育30-60分钟。

引物设计参考http://primerexplorer.jp/lampv5e/index.html或者https://lamp.neb.com/#!/

Loop引物不是LAMP反应必需的,但是使用Loop引物可以缩短约1/3扩增时间。

建议设置无模板对照反应以确保扩增的特异性。

优化反应可调整Mg2+浓度(4-10mM),酶量(1-8U)或反应温度(50-68ºC)

严格遵守PCR实验室操作规程,避免发生污染。