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最适反应温度为50-52℃,在37-56℃有转录活性率
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包装内容:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P2033 | Thermostable T7 RNA Polymerase (50U/μl) | 5000U |
K1005 | NTP Mixture (10mM each) | 250μl |
B2033 | 10X Thermostable T7 RNA Polymerase Buffer | 100μl |
产品简介:
来源于噬菌体T7的RNA基因工程聚合酶。适用于更高温度的RNA体外转录反应,最适反应温度为50-52℃,在37-56℃有转录活性。
高度特异性识别T7启动子序列的DNA依赖5’→3’RNA聚合酶。
催化单链或双链DNA T7启动子下游互补RNA合成。
转录过程RNA分子加帽效率更高,RNA产物由于双链副产物更少从而免疫原性更低。
用于RNA探针标记,RNA分子合成下游用途包括分子杂交、基因组DNA序列分析、核糖核酸酶保护分析、反义RNA合成、体外翻译模板、RNA剪切底物,RNA二级结构和RNA-蛋白相互作用,核酸扩增分析,siRNA、miRNA等小RNA。
于50℃、60分钟内催化完成1nmole AMP掺入到多聚核苷酸中所需要的酶量定义为1个活性单位。
T7启动子序列:5′-TAATACGACTCACTATAG-3′,下划线标注的G为转录起始碱基。
使用说明:
反应体系:解冻并彻底混匀各组分,设置如下反应体系。
Component | 20μl reaction | Final Concentration |
10X Thermostable T7 RNA Polymerase Buffer | 2μl | 1X |
NTP Mixture (10mM each) | 1μl | 0.5Mm each |
线性DNA模板 | 0.2-1μg | |
RNase Inhibitor(可选) | 0.5μl | 1U/μl |
Thermostable T7 RNA Polymerase | 2μl | 100U |
Nuclease-free water | Up to 50µl |
轻轻混匀后短暂离心,于50℃孵育1小时。