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SP6 RNA Polymerase

SP6 RNA Polymerase

ssdsDNA SP6启动子下游RNA合成

*若您需要这支酶的表达载体和菌株,可以联系我们。

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ssdsDNA SP6启动子下游RNA合成

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-20℃储存,<0℃运输。

 

包装内容:

产品编号

产品名称

包装

P2031

SP6 RNA   Polymerase (20U/μl)

2000U

K1005

NTP Mixture   (10mM each)

100μl

B2031

10X SP6 RNA   Polymerase Buffer

150μl

  

产品简介:

来源于噬菌体SP6RNA聚合酶基因。

高度特异性识别SP6启动子序列的DNA依赖5’→3’RNA聚合酶。

催化单链或双链DNA SP6启动子下游互补RNA合成。

用于RNA探针标记(生物素、地高辛、荧光素等)RNA分子合成下游用途包括分子杂交、基因组DNA序列分析、核糖核酸酶保护分析、反义RNA合成、体外翻译模板、RNA剪切底物,RNA二级结构和RNA-蛋白相互作用,核酸扩增分析,siRNAmiRNA等小RNA

37℃60分钟内催化完成1 nmole AMP掺入到多聚核苷酸中所需要的酶量定义为1个活性单位。

SP6启动子序列:5′-ATTTAGGTGACACTATAG-3′,下划线标注的G为转录起始碱基。

  

使用说明:

反应体系:解冻并彻底混匀各组分,设置如下反应体系。

Component

20μl reaction

Final Concentration

10X SP6 RNA Polymerase   Buffer

2μl

1X

NTP Mixture (10mM each)

1μl

0.5mM each

线性DNA模板

1μg


RNase Inhibitor(可选)

0.5μl

1U/μl

SP6 RNA Polymerase

2μl

40U

Nuclease-free water

Up to 50µl


轻轻混匀后短暂离心,于37℃孵育1-2小时。取1μl转录产物于1%琼脂糖电泳分析。

短的转录本反应可以适当延长孵育时间至2-16小时。

1µg模板DNA可合成超过10µgRNA,提高NTP浓度至4mM/MgCl220mM可以提高RNA产量。

注意事项:

酶取用时宜保存于冰盒内,使用完即放回-20ºC保存。

仅限于专业人员科研用,严禁用于临床诊断或治疗,食品或药品,不得存放于普通住宅内。

请穿戴实验服和一次性手套操作。