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ss或dsDNA SP6启动子下游RNA合成
*若您需要这支酶的表达载体和菌株,可以联系我们。
-20℃储存,<0℃运输。
包装内容:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P2031 | SP6 RNA Polymerase (20U/μl) | 2000U |
K1005 | NTP Mixture (10mM each) | 100μl |
B2031 | 10X SP6 RNA Polymerase Buffer | 150μl |
产品简介:
来源于噬菌体SP6的RNA聚合酶基因。
高度特异性识别SP6启动子序列的DNA依赖5’→3’RNA聚合酶。
催化单链或双链DNA SP6启动子下游互补RNA合成。
用于RNA探针标记(生物素、地高辛、荧光素等),RNA分子合成下游用途包括分子杂交、基因组DNA序列分析、核糖核酸酶保护分析、反义RNA合成、体外翻译模板、RNA剪切底物,RNA二级结构和RNA-蛋白相互作用,核酸扩增分析,siRNA、miRNA等小RNA。
于37℃、60分钟内催化完成1 nmole AMP掺入到多聚核苷酸中所需要的酶量定义为1个活性单位。
SP6启动子序列:5′-ATTTAGGTGACACTATAG-3′,下划线标注的G为转录起始碱基。
使用说明:
反应体系:解冻并彻底混匀各组分,设置如下反应体系。
Component | 20μl reaction | Final Concentration |
10X SP6 RNA Polymerase Buffer | 2μl | 1X |
NTP Mixture (10mM each) | 1μl | 0.5mM each |
线性DNA模板 | 1μg | |
RNase Inhibitor(可选) | 0.5μl | 1U/μl |
SP6 RNA Polymerase | 2μl | 40U |
Nuclease-free water | Up to 50µl |
轻轻混匀后短暂离心,于37℃孵育1-2小时。取1μl转录产物于1%琼脂糖电泳分析。
短的转录本反应可以适当延长孵育时间至2-16小时。
每1µg模板DNA可合成超过10µg的RNA,提高NTP浓度至4mM/MgCl2至20mM可以提高RNA产量。
注意事项:
酶取用时宜保存于冰盒内,使用完即放回-20ºC保存。
仅限于专业人员科研用,严禁用于临床诊断或治疗,食品或药品,不得存放于普通住宅内。
请穿戴实验服和一次性手套操作。