T4 DNA Ligase

-20℃储存，<0℃运输。

包装内容：

产品简介：

来源于噬菌体T4 gene30的重组连接酶。

催化双螺旋DNA或RNA中并排的5-磷酸基和3-羟基之间磷酸二酯键的形成。

DNA片段黏性末端或平末端连接，对单链核酸无活性。

修复双螺旋DNA、RNA或DNA/RNA杂合体中的单链缺口。

T4 DNA连接酶需要ATP作为辅因子。

可用于克隆限制性内切酶生成的DNA片段/PCR产物、双链寡核苷酸连接子或接头与DNA 相连、定点突变、扩增片段长度多态性(AFLP)、连接酶介导的RNA检测、双螺旋DNA、RNA或DNA/RNA杂交体中的缺口修复、线性DNA的自环化。

16℃、30min内完成HindⅢ酶切完全的λDNA产物的50%连接反应所需要的酶量定义为1个活性单位。

在常规限制性内切酶、PCR和RT反应缓冲液（补充ATP时）中均有活性。

使用说明：

反应体系：解冻并彻底混匀各组分，于冰浴设置如下反应体系。

黏性末端连接可于16℃孵育过夜或室温孵育10分钟。

平末端或单碱基overhang可于16℃孵育过夜或室温孵育2小时。

取1-5μl连接产物转化感受态。为提高转化效率，可以热失活T4酶（65℃，10min），预冷产物、柱纯化或酚氯仿抽提纯化DNA。