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链置换聚合酶
*若您需要这支酶的表达载体和菌株，可以联系我们。
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包装内容：
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P2008 | Bsu DNA Polymerase I, Large Fragment (5U/μl) | 500U |
K1001 | dNTP (2.5mM each) | 150μl |
B2008 | 10X Bsu Reaction Buffer | 250μl |
B1002 | 5X Annealing Buffer for DNA Oligo | 1ml |
产品简介：
来源于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis, Bsu) DNA聚合酶大片段，具有5'→3' DNA聚合酶活性，不具有3'→5'和5'→3'的核酸外切酶活性。具有链置换(strand displacement)活性，常用于重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)反应，其扩增(isothermal amplification)温度通常为37℃。
用于链置换DNA合成，随机引物标记，cDNA第二链合成，DNA单个dA加尾反应。
由于缺乏3'→5'核酸外切酶活性，Bsu DNA Polymerase, Large Fragment不能切除3'未配对的突出末端，因而不适用于产生平末端。
在37℃、30分钟内催化完成10nmole dNTP掺入到酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位。
无外源核酸酶活性。
使用说明：
DNA模板延伸反应体系
Component | Volume | Final Concentration |
DNA Template | xµl | 10µM |
Primer (20µM) | 25µl | 10µM |
5X Annealing Buffer for DNA Oligo | 10µl | 1X |
Nuclease-free Water | Up to 50µl | |
90ºC孵育1分钟，然后梯度降温（1℃/分钟）至25ºC退火形成Primer/Template杂交双链。 | ||
Annealed Primer/template (10µM) | 1µl | 0.5µM |
10X Bsu Reaction Buffer | 2µl | 1X |
dNTP Mix (2.5mM each) | 1µl | 125µM each |
Bsu DNA Polymerase I, Large Fragment (5U/μl) | 1µl | 5U |
Nuclease-free Water | 15µl | |
Total Volume | 20µl | |
轻轻混匀后短暂离心，37ºC行孵育适当时间，延伸速率约1kb/min。75ºC孵育20min以终止反应。
