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E. coli尿嘧啶-DNA糖基酶(UDG)催化从含尿嘧啶的DNA上释放尿嘧啶,可水解单链或双链DNA上的尿嘧啶
*若您需要这支酶的表达载体和菌株,可以联系我们。
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包装内容:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P2071 | Uracil-DNA Glycosylase (5U/μl) | 1000U |
产品简介:
来源于大肠杆菌Uracil-DNA Glycosylase (UDG)基因。
催化含尿嘧啶的DNA链中的尿嘧啶(dU)碱基和脱氧核糖之间的N-糖苷键水解,释放游离尿嘧啶。
可水解含有dU的单链或双链DNA,但不能水解RNA或含有dU的长度不超过6个碱基DNA寡聚体。
用于消除PCR扩增过程中的产物污染问题。其原理为:在PCR反应中以dUTP替代dTTP,形成含dU碱基的PCR扩增产物;后续PCR反应前,使用UDG酶选择性切割可能被污染而带入的之前PCR扩增产生的含有dU的单链或双链DNA,从而避免之前的PCR扩增产物可能的污染对于本次PCR扩增带来的负面影响。
可用于防止PCR产物的交叉污染;单核苷酸多态性检测(single nucleotide polymorphism detection,GMPD);位点特异性突变;蛋白质与DNA相互作用研究;SNP基因分型;PCR产物的克隆;制备含有单链突出末端的PCR产物或cDNA。
于37℃、1分钟内催化完成60 pmole尿嘧啶从含尿嘧啶双链DNA释放需要的酶量定义为1个活性单位。
UDG在较广的pH值范围内均有活性,最适pH为8.0,不需要二价阳离子。活性受高离子强度(> 200 mM)所抑制。
95ºC加热10分钟可以使95% E. coli UDG失活。由于经95ºC加热10分钟处理后,其仍保持部分活性,建议加入UDG抑制剂(如来自枯草芽孢杆菌噬菌体PBS2的Ugi蛋白或噬菌体phi29的p56蛋白)进一步抑制其酶活以免其继续降解含有dU的PCR产物。
注意事项:
酶取用时宜保存于冰盒内,使用完即放回-20ºC保存。
仅限于专业人员科研用,严禁用于临床诊断或治疗,食品或药品,不得存放于普通住宅内。
请穿戴实验服和一次性手套操作。