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高浓度版本的T7 RNA聚合酶(1000U/μl)
适用于有经验的用户
*若您需要这支酶的表达载体和菌株,可以联系我们。
-20℃储存,<0℃运输。
包装内容:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P20321 | T7 RNA Polymerase (1KU/μl) | 25KU |
K1005 | NTP Mixture (10mM each) | 1ml |
B2032 | 10X T7 RNA Polymerase Buffer | 750μl |
产品简介:
来源于噬菌体T7的RNA聚合酶基因。
高度特异性识别T7启动子序列的DNA依赖5’→3’RNA聚合酶。
催化单链或双链DNA T7启动子下游互补RNA合成。
用于RNA探针标记,RNA分子合成下游用途包括分子杂交、基因组DNA序列分析、核糖核酸酶保护分析、反义RNA合成、体外翻译模板、RNA剪切底物,RNA二级结构和RNA-蛋白相互作用,核酸扩增分析,siRNA、miRNA等小RNA。
于37℃、60分钟内催化完成1nmole AMP掺入到多聚核苷酸中所需要的酶量定义为1个活性单位。
T7启动子序列:5′-TAATACGACTCACTATAG-3′,下划线标注的G为转录起始碱基。
使用说明:
反应体系:解冻并彻底混匀各组分,设置如下反应体系。
Component | 20μl reaction | Final Concentration |
10X T7 RNA Polymerase Buffer | 2μl | 1X |
NTP Mixture (10mM each) | 4μl | 0.5mM |
线性DNA模板 | 0.2-1μg | |
RNase Inhibitor(可选) | 0.5μl | 1U/μl |
T7 RNA Polymerase High Concentration | 0.1μl | 100U |
Nuclease-free water | Up to 50µl |
轻轻混匀后短暂离心,于37℃孵育1-2小时。短的转录本(<300nt)反应可以适当延长孵育时间至2-16小时。取1μl转录产物用于1%琼脂糖电泳分析。