感受态细胞名称：TG1 competent cells；TG1感受态细胞

菌种类型：E.coli

培养基：2YT或LB培养基

产品规格：10×100μl

转化效率：1~5 × 10⁹ cfu/µg pUC19

基因型：[F´traD36 proAB lacI^qZΔM15] supE thi-1Δ(lac-proAB)Δ(mcrB-hsdSM)5(r_K^–m_K^–)

抗性：无抗性

转化条件：42 ℃热激

培养条件：37 ℃,  有氧

用途：常用于快速质粒扩增和质粒构建

储存条件：-80 ℃保存，干冰运输

特点和简介

n  TG1来源于E. coli K-12菌株，是目前生长速度最快的克隆用大肠杆菌菌株，在平板上37℃，7小时可见克隆；

n  主要的噬菌体展示用菌株，同时也可用于普通质粒的构建，lacIqZΔM15的存在使其可以用于蓝白斑筛选等实验。

简化转化步骤

1.         取TG1感受态细胞置于冰浴融化。

2.         加入质粒DNA (1~100 ng），轻弹混匀，冰浴静置30分钟。

3.         42 ℃水浴热激90秒，快速转移至冰浴静置冷却3分钟。

4.         加入无抗培养基（SOC或LB），混匀后37 ℃，225rpm摇床振荡培养45分钟。

5.         取100μl培养物均匀涂布至对应抗性的琼脂培养板。37 ℃倒置培养12-16小时。

注意：如果必要可以离心（4000 rpm，3分钟）收集所有菌体，吹打悬浮后涂布平板。

注意事项

1.         -80 ℃保存，避免反复冻融和放置时间过长。

2.         感受态细胞最好在冰中缓慢融化，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。进行转化操作时，应根据相应的温度及无菌条件的要求进行。转化物的体积不能超过感受态细胞体积的1/10。

3.         混入质粒时应轻柔操作。